Étirement du génome pour une visualisation et une analyse directes
Le FiberComb® (Système de Peignage Moléculaire) est un instrument automatisé breveté qui étire les molécules individuelles d’ADN sur des surfaces en verre spécialement traitées.
Le FiberComb est conçu pour exécuter le peignage moléculaire en une seule procédure simple et rapide, de façon optimale et reproductible.
Par conséquent, chaque lamelle de verre contient des millions de molécules d’ADN peigné prêtes pour l’hybridation et la visualisation directe.
Les molécules individuelles d’ADN sont définitivement fixées à une surface en verre
Peignage avec un facteur d’étirement constant (1µm ≈ 2 kb)
La taille des molécules d’ADN est comprise entre quelques kb et plusieurs Mb
Alignement parallèle des molécules individuelles d’ADN
Les extrémités de l’ADN ne sont pas chimiquement modifiées
Meilleure intégrité des molécules d’ADN
Fonctionnement
L’ADN est extrait et purifié à partir des échantillons puis la solution d’ADN est placée dans le réservoir jetable du FiberComb. Deux CombiCoverslips d’une surface de 22mm2 (véhicules en verre spécialement traités avec du silane vinylique) sont clipsés au FiberComb et rapidement immergés dans le réservoir contenant la solution d’ADN. Les lamelles sont incubées brièvement avec la solution d’ADN pour permettre à l’ADN de se fixer à la surface en verre par une ou deux de ses extrémités.
Les CombiCoverslips sont ensuite retirés automatiquement à vitesse constante (300 μm/s) de la solution d’ADN, étirant ainsi l’ADN de façon contrôlée et régulière. L’étirement est possible grâce au ménisque air-liquide sortant, qui entraîne l’extension et l’alignement parallèle des molécules d’ADN. Chaque molécule d’ADN est peignée avec un facteur d’étirement constant (2 kb/µm), permettant une mesure précise et directe sur toute la longueur des molécules d’ADN.
